Le spectrofluorimètre NanoDrop3300 est un instrument à source optique multiple permettant d’effectuer des mesures de fluorescence. Cet appareil compact offre à l’utilisateur une fléxibilité d’utilisation exclusive de la fluorescence grâce à ses différentes caractéristiques.
Ce système combine la technologie brevetée de rétention d’échantillon NanoDrop, au filtre virtuel (cf. rubrique technologie pour plus de détails) pour l’application de la lumière blanche des LEDs, il permet des mesures à travers un large spectre de longueurs d’onde et ce, en utilisant des volumes d’échantillons faibles (entre 1 et 2 microlitres) sans utiliser de cuvette, ni besoin de couteux changements de filtres.
Le système de rétention d’échantillon utilisé par le spectrofluorimètre NanoDrop3300 permet l’analyse de volumes d’échantillons extrêmement faibles (1-2 microlitres) sans utiliser de cuvette ni de capillaire. Préparer l’appareil à une autre mesure nécessite seulement le nettoyage de l’échantillon avec un simple papier filtre. Cela permet d'économiser sur le coût des cuvettes jetables ou sur le temps et les efforts nécessaires pour le nettoyage des cuvettes réutilisables.
Lorsque le bras de l'appareil est relevé, une goutte d'échantillon est déposée sur la surface inférieure de mesure.
Dès que le bras est abaissé au niveau horizontal, un système d’aimant est activé et le bras compresse la goutte de liquide, formant une colonne de liquide. L’échantillon est maintenu entre les deux surfaces de lecture par tension de surface, permettant la mesure du spectre.
La mesure est alors réalisée et la quantification est basée sur le trajet optique de 1 mm.
Une fois la mesure terminée, le bras est relevé à la verticale et l’échantillon est tout simplement essuyé sur les deux surfaces de lecture (inférieure et supérieure) avec un papier absorbant couramment utilisé au laboratoire.
Source lumineuse
Le principe combiné de microcomposants optiques, du système breveté de rétention de l'échantillon et de l'éclairage par LED permet des mesures sur une grande gamme de longueurs d'onde. La source d'excitation vient d'une des 3 LEDs (light emiting diodes) orientées à 90° par rapport au détecteur.
Les maxima d'émission sont:
Excitation lumière UV = 365 nm - filtrée (<5% de transmittance sous 400nm)
Excitation lumière Bleue = 470 nm
Excitation lumière Blanche = 550 nm
La lumière d'émission est mesurée classiquement à un angle de 90° par rapport à la source d'excitation. Le détecteur est constitué d'un CCD couvrant le spectre entre ~395nm et 900nm, connecté à la surface de mesure par une fibre optique. Le spectrofluorimètre est configuré avec un filtre qui élimine la lumière transmise en-dessous de 395 nm.
Performances
Les résultats des études conduites par Thermo Scientific sur différents fluorophores sont disponibles ci-dessous: